细胞培养过程中，如何预防支原体污染？

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细胞培养过程中，如何预防支原体污染？
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同花顺

支原体是一种微小的细菌样生物，可以感染哺乳动物细胞，并繁殖在细胞内。支原体污染会导致细胞培养中的数据不可靠，对实验结果产生严重影响。因此，及早发现并处理细胞培养中的支原体污染至关重要。
细胞培养中的支原体污染有许多迹象。以下是一些常见的迹象：
1. 细胞形态异常：支原体感染会导致细胞形态异常，如细胞变形、体积增大或缩小、细胞核异常等。
2. 细胞生长缓慢：支原体感染会抑制细胞生长，导致细胞生长缓慢或停滞。
3. 细胞死亡增加：支原体感染会导致细胞死亡增加，导致细胞密度降低。
4. 细胞污染：支原体感染会导致细胞表面出现异物，如细胞表面出现小颗粒或细菌等。
5. 细胞内部结构异常：支原体感染会导致细胞内部结构异常，如线粒体形态异常、内质网扩张等。
6. 细胞功能受损：支原体感染会导致细胞功能受损，如分泌功能异常、细胞凋亡等。
如果发现细胞培养中出现上述迹象，就应该怀疑细胞培养中存在支原体污染。为了确认是否存在支原体污染，可以进行以下检测：
1. PCR检测：PCR检测是检测支原体最常用的方法之一。通过PCR扩增支原体DNA序列，可以检测细胞培养中是否存在支原体。
2. 培养检测：将细胞培养液接种到含有适宜营养物质的培养基上，观察是否出现细菌样生物的生长。
3. 免疫荧光染色：使用特异性抗体染色，观察细胞内是否存在支原体。
如果确认存在支原体污染，应该立即采取措施进行处理。常用的处理方法包括：
1. 抗生素治疗：使用特定的抗生素治疗支原体感染是最常用的方法之一。常用的抗生素包括红霉素、四环素等。但是需要注意的是，不同的支原体对不同的抗生素敏感性不同，因此需要进行药敏试验，选择最适合的抗生素进行治疗。
2. 细胞冻存：如果发现细胞培养中存在支原体污染，可以将细胞冻存，然后重新开始细胞培养。
3. 培养基更换：更换新的培养基可以清除细胞培养中的支原体污染。
4. 清洗仪器：细胞培养中使用的仪器也容易被支原体污染，因此需要对仪器进行清洗和消毒。
细胞培养中的支原体污染是一种常见的问题，但只要及早发现并采取措施进行处理，就可以避免对实验结果产生不良影响。因此，在进行细胞培养实验时，应该注意细胞培养条件的卫生和消毒，以及及时发现和处理支原体污染。
此外，还有一些预防支原体污染的措施可以采取，包括：
1. 培养环境的消毒：在进行细胞培养之前，应该对实验室环境进行彻底的消毒，包括培养箱、显微镜、移液器等实验室仪器。
2. 细胞的来源：选择健康的细胞作为培养细胞的来源，避免使用已经被感染的细胞。
3. 培养基的制备：制备培养基时，应该使用高质量的培养基原料，并在制备过程中注意消毒。
4. 培养细胞的操作：在培养细胞的过程中，应该避免污染的情况发生，例如使用无菌操作技术、定期更换培养基等。
总之，细胞培养中的支原体污染是一种常见的问题，但只要注意预防和及时发现处理，就可以避免对实验结果产生不良影响。在进行细胞培养实验时，应该严格遵守实验室操作规范，注意卫生和消毒，以及定期检查细胞培养的质量。
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在细胞培养中，支原体污染是常见问题。我们采用恒温扩增与侧向层析技术相结合，推出了支原体检测试纸。检测灵敏度媲美PCR，检测结果与培养法（药典标准）高度一致。



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支原体检测结果对比：



培养法，PCR荧光探针法，试纸法，检测结果对比

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细胞培养是进行细胞生物学研究时最基础的实验，是将离体的组织细胞置于模拟在体内生存的环境中，让其生长和发育的方法。奥克泰士专为细胞室环境消毒提供定制解决方案。细胞作为重要的实验模型广泛应用于各类生物实验, 几乎所有科研实验室中都需进行细胞培养。细胞培养过程中最大的威胁就是细胞房环境污染, 细胞一旦遭到污染, 所有的实验结果都会变得毫无意义。



细胞房细胞培养房污染如何消毒灭菌

一般细胞房分为5个区：一般细胞房有五个工作区：无菌操作区、孵育区、制备区、清洗消毒灭菌区和储藏区。
1、无菌操作区：无菌操作区只限于细胞培养及其他无菌操作，最好能与外界隔离，不能受到穿行或受其他干扰。一般由更衣间、缓冲间和操作间三部分组成。
更衣间：提供更换实验服、鞋子及穿戴帽子、口罩和手套。
缓冲间：位于更衣间与操作间之间。目的是为了保证操作间的无菌环境，同时可放置细胞培养箱及某些必需的小型仪器。
无菌操作间：专用于无菌操作、细胞培养。
2、孵育区：孵育区对无菌的要求虽没有无菌区严格，但仍需保持清洁无尘。因此也应设置在干扰少且非来往穿行的区域。孵育可在孵箱或可控制温度的温室中进行。
3、制备区：主要进行培养液及有关培养用的液体制备。
4、清洗和消毒灭菌区：应与其他区域分开，主要进行所有细胞培养器皿的清洗、准备、消毒及三蒸水制备等工作。
5、储藏区：主要存放各类冰箱、干燥箱、液氮罐、无菌培养液、培养瓶等设备。此环境同需要清洁无尘。
如何有效避免微生物污染问题呢？
1、重视细胞房管理工作，规范操作 定期进行细胞房清洁消毒工作，规范实验人员操作（如身着白大褂、换鞋等），创造洁净培养环境。  
2、避免频繁查看细胞 做好实验规划，减少培养箱门开关的频率，取放细胞时需佩戴洁净的手套，并用少量的 70% 医用酒精（过多会导致培养箱中残留乙醇蒸汽）擦拭培养瓶/皿表面，从而降低细胞培养箱污染的风险；
3、期维护和灭菌，预防污染 定期清洁维护，培养箱内用水灭菌后使用并定期更换，选择培养箱时，可优先考虑有自动灭菌功能的培养箱。细胞房一旦发生污染，及时进行消毒灭菌工作。
奥克泰士即用型杀孢子剂使用过程中无色无味、无毒无残留，安全可靠，生态安全环保。对材料的兼容性很好对金属等材料基本无腐蚀 。
奥克泰士主要成分过氧化氢 银离子。食品级无色无味无毒无残留型，IFS国际食品标准认证，欧盟EMAS检测认证，ISO9001、ISO14001环境管理体系认证等。德国莱茵TUV认证。经过了欧盟及众多国外研究机构组织检测，在被欧洲大多数国家广泛应用的同时，是一款高效广谱的食品级杀孢子剂。具有杀菌彻底，不产生微生物耐药性，无任何毒性残留，不造成重复污染等特点。



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应用领域:实验室内部环境（地面、物体表面、墙壁、空气等）、实验室一般实验器材（玻璃器材、塑料、橡胶、无纺布制品、贵重仪器、纸张等）、实验室人员(人体及防护用品）、实验室生物安全柜、隔离器（仓）、实验样本、感染性废弃物（被感染性实验材料污染的实验用品及废弃的感染性实验样本、培养液、培养基、鸡胚等）
杀菌性能稳定，不易受环境HP、温度及光照的影响，彻底杀灭微生物不会产生耐药性。
杀菌作用迅速，3-5分钟可以杀灭芽孢，大大节约时间，从而提高企业的生产效率。
性价比高，微量就能达到高效的杀菌效果。
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关键词：PCR实验室核酸污染去除液 诺沃赛德核酸污染去除剂 核酸气溶胶污染
过氧化氢消毒-过氧化氢消毒灭菌器-过氧化氢干雾消毒-救护车消毒-实验室消毒气溶胶污染一般是在提取阳性样品的核酸或PCR时使用移液器加样时产生，一个气溶胶粒子能携带上万个DNA分子，这些DNA分子漂浮在空气中，难以消除，部分可附着在检测人员的衣物上，随着人或物的流通而进一步污染整个实验室，对实验结果产生严重的干扰，因此去除PCR实验室核酸气溶胶污染是必要的工作。


PCR实验室应该如何高效去除核酸气溶胶污染呢？
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检验医师

人员操作、被污染的细胞、原辅料（血清、胰酶、培养基），实验环境污染（生物安全柜、细胞间，培养箱）、实验仪器（水浴锅、液氮罐）、实验耗材（培养皿、方瓶、细胞工厂）都可能是污染源，但是人源的污染概率最大，数据表明80.6%的实验人员为支原体携带者。
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