检测时间仅15分钟！呼吸道四联分子试剂获批！来看看罗氏提交的注册资料当中包含哪些内容

4月25日，FDA批准了罗氏的呼吸道四联分子试剂，它可以同时检测SARS-CoV-2、甲型流感、乙型流感和呼吸道合胞病毒这四种常见呼吸道病毒。

近期，FDA也放出了该产品的安全性和有效性信息摘要，今天，我就来给大家深度解读一下。

基本信息

这款产品的申请人是Roche Molecular Systems, Inc.，产品专用名称为cobas liat® SARS-CoV-2, Influenza A/B & RSV nucleic acid test，通用名称为cobas® liat SARS-CoV-2, Influenza A/B & RSV

主要是用于在多目标测试中检测和鉴定来自导至SARS-Cov-2呼吸道感染的微生物和其它微生物的呼吸道标本中的核酸目标的器械，所以分类代码是21 CFR 866.3981，产品代码是QOF。

该产品选择比对的先例器械是Hologic生产的HOLOGIC Panther Fusion® SARS-CoV-2/Flu A/B/RSV Assay，510(K)编码为K241240。

预期用途

该试剂是一种自动化的快速多重实时逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测，用于同时定性检测和区分SARS-CoV-2、甲流病毒、乙流病毒和呼吸道合胞病毒（RSV）核酸。

主要是用于在帮助对人类感染的SARS-CoV-2、甲流、乙流和RSV进行鉴别诊断，但不能用于丙型流感病毒感染的检测。

另外，检测结果不应作为诊断、治疗或患者管理决策的唯一依据，阳性结果不排除与其他生物体的混合感染，阴性结果也不排除相关病毒感染。

产品概述

这款试剂使用实时PCR技术，检测SARS-CoV-2、甲流、乙流和RSV RNA，靶基因序列设计主要针对SARS-CoV-2特有的ORF1 a/b非结构区域和膜蛋白基因、甲流基因的高度保守区域、乙流非结构蛋白1（NS1）基因和RSV（RSV目标）基质基因。

样品类型为鼻咽和前鼻拭子，有四种辅助采集试剂盒可以用，配套设备是cobas® liat分析仪，采用实时定量PCR技术，15分钟内可以出结果，使用不同的报告染料对目标和对照进行测定。

同时在试剂盒包含内部质控（IC），用于控制目标病毒在测定流程的所有步骤中得到充分处理，并监测RT-PCR流程中是否存在抑制剂。

非临床性能评估

对SARS-CoV-2、甲流、乙流和RSV的每个目标菌株进行评估，确定最低可检测浓度。

如SARS-CoV-2的USA - WA1/2020菌株LoD浓度为0.0350 TCID50/mL，阳性率为20/21（35.5）；甲流的Darwin/6/2021菌株LoD浓度为0.295 TCID50/mL，阳性率为21/21（35.0）等。

评估测试检测多种病毒分离株/变异株的能力。

包括10株SARS-CoV-2，

28株甲型流感病毒（15株H1N1、10株H3N2、1株H5N1、1株H5N2和1株H7N9），

10株乙型流感病毒（5株Victoria和5株Yamagata），

以及5株RSV分离株/变异株，

所有菌株均以约3倍LoD进行3次重复测试。

测试一系列微生物评估交叉反应性和微生物干扰，包括腺病毒、人类冠状病毒等多种微生物，在目标阴性或阳性背景下进行测试，结果表明所有测试的微生物均未与试剂发生交叉反应或干扰。

将高浓度的每个目标与低浓度（约为各自LoD的3倍）的其他三个目标一起进行测试，结果表明当一种病毒目标以高浓度存在时，未观察到对其他三种低浓度（约3倍LoD）病毒目标的干扰。

对呼吸道标本中可能常见的潜在干扰物质进行评估，包括外周血单核细胞、黏液、人全血等多种物质，在含有3LoD目标物质的情况下进行测试，结果表明这些物质不会干扰检测，也不会导至阴性样品出现无效结果。

在三个研究地点评估不同操作员、研究地点、测试日期、分析仪和测试管批次在检测方面的总变异性。

结果表明与预期结果的符合率较高，如阴性标本符合率为100.0%，SARS-CoV-2不同浓度标本符合率均为100.0%，甲流、乙流、RSV不同浓度标本符合率也较高，且循环阈值（Ct）值的变异系数较小。

临床性能评估

在美国14个点护理测试地点进行非干预性研究，收集并测试前瞻性临床（I类）标本。

对于NPS标本，对SARS-CoV-2的PPA和NPA分别为94.5%和97.6%；对甲流的PPA和NPA分别为100.0%和99.3%；对乙流的PPA和NPA分别为100.0%和99.3%；对RSV的PPA和NPA分别为100.0%和99.0%。

对于ANS标本，对SARS-CoV-2的PPA和NPA分别为96.7%和97.2%；对甲流的PPA和NPA分别为100.0%和99.3%；对乙流的PPA和NPA分别为100.0%和99.5%；对RSV的PPA和NPA分别为97.5%和98.8%。

初始无效率分别为0.5%和0.7%，经重复测试后最终测定无效率分别为0%和0.1%。

对冷冻临床NPS和ANS标本进行测试，补充前瞻性研究结果。

对于回顾性NPS标本，对乙流的PPA和NPA分别为100.0%和97.9%；对于回顾性ANS标本，对乙流的PPA和NPA分别为100.0%和98.3%，未发现无效结果，无效率为0.0%。

三个关键问题

好，和之前一样，最后我用三个关键问题把这份审评报告的相关内容串联起来。

第一个问题，cobas liat® SARS-CoV-2, Influenza A/B& RSV核酸测试的分析灵敏度（检出限）是如何确定的？

分析灵敏度（检出限）是通过一系列实验确定的。

具体来说，研究者使用混合的阴性鼻咽拭子基质稀释培养或灭活的病毒材料，配制了添加了病毒的检测组合。

每批稀释液每批检测管测试21次重复，使用三批检测管进行五次或六次2倍稀释。

通过对每个目标（SARS-CoV-2、甲流、乙流和RSV）的两个菌株进行评估，确定其最低可检测浓度，即所有重复测试中95%以上为阳性的浓度。

例如，SARS-CoV-2的USA-WA1/2020菌株的LoD浓度为0.0350 TCID50/mL，甲流的Darwin/6/2021菌株的LoD浓度为0.295 TCID50/mL。

第二个问题，在临床性能评估中，cobas liat® SARS-CoV-2, Influenza A/B& RSV核酸测试的前瞻性研究和回顾性研究分别采用了哪些样本？

在前瞻性研究中，研究者使用从具有呼吸道病毒感染症状的个体中采集的配对前瞻性新鲜鼻咽拭子（NPS）和前鼻拭子（ANS）标本。

这些标本在通用病毒运输介质（UVT）或通用运输介质（UTM）中保存，并在2023年9月至2024年3月期间在美国14个点护理测试地点进行测试。

在回顾性研究中，研究者对2019年至2023年期间获得的冷冻存档乙流阳性和阴性NPS和ANS标本进行了测试。

这些标本分配到6个地点，并在日常工作流程中进行测试。

第三个问题，cobas liat® SARS-CoV-2, Influenza A/B& RSV核酸测试在交叉反应和微生物干扰方面有哪些发现？

在交叉反应和微生物干扰测试中，研究者测试了一系列微生物，包括腺病毒、人类鼻病毒、结核分枝杆菌等，未发现任何交叉反应或干扰。

此外，还对高滴度潜在交叉反应微生物进行了交叉反应性测试，并在存在SARS-CoV-2、甲流、乙流和RSV（浓度为3倍LoD）的情况下进行微生物干扰测试。

所有测试的微生物在测试浓度下均未与cobas liat® SARS-CoV-2, Influenza A/B& RSV核酸测试发生交叉反应或干扰。

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